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PCR实验室污染事件处理!你可能缺少它!!!

发布时间:2021-03-10浏览:534次

PCR实验室污染事件处理!你可能缺少它!!!

 
如今,因为检测量的加大,实验室污染所导致的假阳性问题越来越严重,如幽灵般如影随行。而现在的部分检测实验室为了提高检测的灵敏度,通过高投入采购高品质的仪器和试剂来解决,这种投入产出*。检测的特点也慢慢地体现了检测质量不能简单用仪器和试剂的品牌价格来评估,人外加严格的试验流程和管理制度才是检测的核心

 

今天我想跟大家分享一个生在实验室的核酸污染案例,从发现污染到处理的全过程。
 
 

核酸污染不能避免

 
 

核酸检测实验室的污染想全部避免是不可能的,我们能做的是随时随地保持警惕,尽早发现,及时处置,尽量减少损失。

 
一天,一次PCR实验中检测员发现虽然阴性对照成立,但是4份阴性样品都出现了扩增曲线。可以说实验中肯定发生了污,但是污染是从何时开始的?污染源是什么?试验被影响到的有多少?我们需要一一排查。
 
 
 
仔细排查和清洁
 
 

 

1.实验活动全部停止,查看当天所有的试验结果,发现受到污染的只有一个实验

 

2.开封的剂耗材全部清理包括试剂准备区、核样本制备区和扩增区

 

3.试管架离心管架等可重复使用的物品浸泡到84消毒液中过夜,直到第二天用清水清洗晾晒后使用,注意一定要晒干;

 

4.酒精核酸提取仪内部、移液器内外表面,再用核酸去除剂擦拭,同时启用备用的移液器;

 

5.用酒精对各区的生物安全柜、洁净工作台和实验台面拭后,再用核酸去除剂擦拭;

 

6.用84消毒液对实验室地面进行清洁;

 

7.开窗,通风排气。

 


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污染清除的实验验证
 
 
1.开盖装有PBS的离心管放置在试剂准备的洁净工作台面、核酸提取仪内部、扩增区台面样本制备区的生物安全柜内部,过夜;
洁净工作台面
 

生物安全柜内部

 

核酸提取仪内部
 
扩增区台面
 
2.在实验台面、生物安全柜台面和洁净工作台面用采样拭子蘸PBS反复擦拭后,放入PBS中进行洗脱。

生物安全柜台面取样

 

取样后洗脱
 

3.用采样拭子蘸PBS后对移液器的内外表面进行取样,取样后放入PBS中进行洗脱

移液器内表面取样

4.将配液的移液器和加模板的移液器换上无滤芯枪头,在PBS中反复吹吸10次,测试移液器内部是否存在污染。

 

 

测试配液的移液器

 
 
测试结果
 
 

 

1.测试结果发现样本制备区的生物安全柜内加模板的移液器内外表面擦拭拭子为核酸阳性,其他检测都是阴性。

实验室污染测试结果
 
2.对样本制备区的生物安全柜内加模板的移液器进行清洁和擦拭后,第二天对该移液器内表面和外表面擦拭拭子进行检测,仍有扩增分别为39.89和39.63
3.对样本制备区的生物安全柜内加模板的移液器进行清洁和擦拭后,过二天后对该移液器内表面和外表面擦拭拭子进行检测,检测结果为阴性。
移液器污染测试结果
 
 
 
持续监测
 
 

本次污染事件中从发现到清理测试后,完全恢复了实验活动。虽然可以确定的是样本制备区的生物安全柜内加模板的移液器发生了污染。但是由于可能造成污染的因素很多,移液器是否是污染因素我们很难确定。后续的几天仍然在检测中增加阴性对照,持续对环境等样品进行监测,确保污染被彻底清除。

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